實驗室培養基製備要求(qiú)
培養基(jī)製(zhì)備的質量將直接影響微生物生長。因(yīn)為(wéi)各種微生物對其營養(yǎng)要求不完全相同,培(péi)養目的的(de)不同,各種培養基製備要求如下:
1.根據(jù)培(péi)養基配方的成分按量稱取,然後溶於蒸(zhēng)餾水中,在使用前(qián)對應用的試劑藥品應(yīng)進行質量檢驗。
2.PH測定及調節:PH測定要在培養基冷至(zhì)室溫時進行,因(yīn)在熱或冷的情況下,其PH有一定差異,當測定好時,按計算量加入堿或酸混勻後,應再測試一次。培養基PH值(zhí)一定要準確,否則會影響微生物(wù)的生長或影響結果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養基的PH降低或升高,故不宜滅菌壓力過高或次(cì)數太多,以免影響(xiǎng)培養基的質量,指示(shì)劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調完PH後再加入。
3.培養基需保持澄清,便於觀(guān)察細菌的生長情況,培養基(jī)加熱煮沸後,可用脫脂(zhī)棉花或絨(róng)布過濾,以除去沉澱物,必要時可用雞蛋白澄清(qīng)處理,所(suǒ)用瓊(qióng)脂條要預先洗(xǐ)淨晾幹後使(shǐ)用,避免因(yīn)瓊(qióng)脂含雜質而(ér)影響透明(míng)度。
4.盛裝培養(yǎng)基不宜用(yòng)鐵、銅等容器,使用洗淨的中性硬質玻璃容器為好。
5.培養基的滅菌既要達到(dào)完全滅菌目的,又(yòu)要注意不因加熱而降低其營養價(jià)值,一般121℃15min即可,如為含有不(bú)耐高熱物(wù)質的培養基如糖類、血清(qīng)、明膠等,則應采用低溫滅菌或間歇法滅菌(jun1),一些不能加熱(rè)的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等,待基礎瓊脂高壓滅菌後涼(liáng)至50℃左右再加入。
6.每批培養基製備好後,應做(zuò)無菌生長試驗及所檢菌株生長試驗。如果是生化培養(yǎng)基,使用標準菌株接種培養,觀察生化反應結果,應(yīng)呈正常反應,培養基不應貯(zhù)存過久(jiǔ),必要(yào)時(shí)可置4℃冰箱存放。
7.目前各種幹燥培養(yǎng)基較多,每批需用標準菌株進行生長試驗或生化反應觀(guān)察,各種培養基用相應菌株生(shēng)長試驗良好後方(fāng)可應用,新購進的(de)或存放過久的(de)幹(gàn)燥培養基(jī),在配製時也應測PH,使用時需根據產品(pǐn)說明書用量和(hé)方法進行(háng)。
8.每批製備的培養基(jī)所用化(huà)學試劑、滅(miè)菌(jun1)情況及菌株生長試驗結果、製作人員等應做好記錄,以備查詢。