標準的PCR實(shí)驗室設計規劃與建設要求
2021-02-10 10:58:00
1、 主體結構:
主(zhǔ)體為彩鋼板、鋁合金型材。室內所有(yǒu)陰角(jiǎo)、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁,從而(ér)解決容易(yì)汙染、積塵、不易清掃等問題。結構牢固,線(xiàn)條簡明,美觀大方(fāng),密封性(xìng)好。
2、 標準的(de)三區分隔和氣壓調節:
將PCR過程(chéng)分成試劑準備、標本製備和PCR擴(kuò)增檢測三個獨立的實(shí)驗區。整個區域有一個整體(tǐ)緩衝走廊。每個獨立實驗區(qū)設置有緩衝區, 同時各區通過氣壓調節,使整個PCR實(shí)驗(yàn)過程中試劑和(hé)標本免受氣溶膠的汙染並降低(dī)擴增產物對人員和環境(jìng)的汙染。
可打開緩衝區Ⅰ,緩衝區Ⅱ和 PCR 擴增區(qū)的排風扇往外排氣(qì),在(zài)實驗區的外牆上和各扇門(mén)上都安裝有風量可調的回風口,空氣通過回風口向室內(nèi)換氣。
3、 消毒:
在三個實驗區和三個緩(huǎn)衝區頂部以及傳送窗(chuāng)內部(bù)安裝有紫外燈,供消毒用。
在試劑準備區和標本製備區 還設置移(yí)動紫外線燈,對實(shí)驗桌進行局部消毒。
4、 機械連鎖不鏽鋼傳遞窗:
試劑和標本通(tōng)過機械連鎖不(bú)鏽鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳(chuán)遞窗傳遞,保證試劑和標(biāo)本在(zài)傳遞過程中不受(shòu)汙(wū)染(人物分流(liú))。
5、 地麵
地麵建議使(shǐ)用PVC卷材地麵或自(zì)流坪地麵,整體性好。便於進行清掃,耐腐蝕。沒有條件的也可(kě)采用水磨(mó)石地麵,或大塊的瓷磚(至少800mm×800mm)接縫需要小於2mm。
6、 照明
燈(dēng)具要選(xuǎn)用淨化燈具,能達(dá)到(dào)便於清洗、不積塵的特點。
在建設的過程(chéng)中應注意:
●規範的安裝流程和全麵的服務流程。
●嚴格按(àn)照規範科學(xué)設計的安裝流程。
●安裝前需要確定以下安裝條件(jiàn),如:電源電壓,電源進線(xiàn)位置(zhì),電話網(wǎng)絡線進(jìn)線位置,進水水壓,最小安裝空間,地(dì)麵平整度,通風孔、進水管和下水管的位置等(děng),理想狀態的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。
PCR 即聚合酶鏈式反應,是分子生物學研究(jiū)和實驗的常規方法,也是生物學、醫學臨床等領域廣泛應用的(de)實驗技術。其特點是能(néng)將微量(liàng)的DNA大幅增加。實驗室分為四個區域,進入各工作區(qū)域必須嚴格按(àn)照單一方向進行,不(bú)同的工作區域使用不同的(de)工作服(fú)(例如不同(tóng)的顏色(sè))。工作人(rén)員離開各工作區域時,不得將工作服帶出,四(sì)區域分(fèn)別為:
n1.試劑配(pèi)製(zhì)區
n2.樣品處理區
n3.核酸擴(kuò)增區
n4.產物分(fèn)析區(qū)
n如使用全自動分(fèn)析儀,區域可適當合(hé)並
設(shè)計要求:
PCR實驗室可以是分散形式,也可以是(shì)組合形式。完成一組PCR實驗,通常應經過試劑配製、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析(xī)四(sì)個實驗過程,若實驗工藝需要,還應(yīng)增(zēng)加樣品(pǐn)粉碎過程。
一、分散形式PCR實驗室
所謂分散形(xíng)式PCR實驗室,是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠,呈分散(sàn)布置形式。對(duì)於這種布置形式的PCR實驗室,由於各個實驗之間不易相互幹擾,因(yīn)此無需特殊條件要求。
二、組合形式PCR實驗室
所謂組合形式PCR實驗室, 是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置,組成獨立實驗區域的形式。對於組合形式PCR實驗室,由(yóu)於各個實驗間集中布置,容(róng)易造成相互(hù)幹擾,因此,對總體布局以及屏障係統具有一定的要求。各室在入口處設緩衝間,以減(jiǎn)少室內外空氣交換。試劑配製室及樣(yàng)品處理室宜呈微正(zhèng)壓,以防(fáng)外(wài)界含核酸氣(qì)溶膠的空氣進入,造成汙染;核酸擴增室(shì)及產物分(fèn)析室應呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出去汙染試劑(jì)與樣(yàng)品。
如果使用熒光PCR儀,擴增室和產物分析室(shì)可以合(hé)並。
若房間進深允許(xǔ),可設PCR內部專用走廊。需要指出的是在減少室內外空氣交換方麵,緩(huǎn)衝間比(bǐ)專用走廊更有意(yì)義。
各個區域之間(jiān)應具備單向的實驗工藝流、物流、人流(liú)與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互幹擾,防止核酸(suān)氣溶膠對(duì)實驗過程造成汙染產生假性結果。
實驗室的牆體(tǐ),包括頂棚,應結構牢(láo)固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧形線(xiàn)條(tiáo)過渡;牆體內壁光潔(jié)、不吸附、耐腐(fǔ)蝕、易清洗消毒;地麵材料應滿足無縫隙、無滲漏、光(guāng)潔、耐腐蝕的要求。